Méthode d’essai biologique servant à mesurer la survie de collemboles exposés à des contaminants dans le sol : annexe F
Annexe F
Variantes des modes opératoires des essais effectués pour déterminer les effets d’un sol contaminé sur la survie et la reproduction de collemboles, telles que décrites dans des méthodes de portée internationale
Les documents de base sont énumérés ici dans l’ordre chronologique, selon les auteurs ou le sigle de l’organisme dont ils émanent.
W & K (1998) (Wiles et Krogh, 1998) - document décrivant des protocoles de mesure des effets de substances chimiques sur la survie, la croissance et la reproduction de trois espèces de collemboles, à savoir Folsomia candida(Willem, 1902), Isotoma viridis (Bourlet, 1839) et F. fimetaria (Linné, 1758); publié en 1998 dans Handbook of Soil Invertebrate Toxicity Tests, Løkke et van Gestel (dir.), West Sussex, Angleterre.
ISO (1999) - méthode d’essai normalisée internationale pour déterminer la toxicité d’un sol à l’aide d’un essai de mesure des effets sur la reproduction de F. candida, publiée en 1999 par l’Organisation internationale de normalisation, Genève, Suisse.
OCDE (2005) - ébauche de proposition soumise par l’Institut national de recherche sur l’environnement du Danemark à l’OCDE, en vue de la publication d’une nouvelle ligne directrice pour l’évaluation des effets de sols enrichis avec une substance chimique sur la reproduction de deux espèces de collemboles (F. candida et F. fimetaria); actuellement à l’étude par l’OCDE, Paris, France.
1. Espèces expérimentales, type d’essai et durée de l’essai
| DocumentNotes de bas de pagea | Espèce | Type d’essai | Durée de l’essai |
|---|---|---|---|
| W & K (1998) | Folsomia candida(Willem, 1902) | sans/avec renouvellementNotes de bas de page1 | 8 semainesNotes de bas de page2 |
| W & K (1998) | Isotoma viridis (Bourlet, 1839) | sans/avec renouvellementNotes de bas de page1 | 8 semaines |
| W & K (1998) | F. fimetaria(Linné, 1758) | sans renouvellement | 3 semaines |
| ISO (1999) | F. candida (Willem, 1902) | sans renouvellement | 28 jours |
| OCDE (2005) | F. fimetaria(Linné, 1758) | sans renouvellement | 3 semaines |
| OCDE (2005) | F. candida(Willem, 1902) | sans renouvellement | 4 semaines |
2. Caractéristiques des organismes expérimentaux au moment du démarrage de l’essai
| Document | Description des organismes utilisés pour démarrer l’essai | Conditions d’acclimatation | Âge des organismes au moment du démarrage de l’essai |
|---|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | juvéniles provenant d’élevages synchrones | n.i.Notes de bas de page3 | 10-12 jours |
| W & K (1998) I. viridis | juvéniles provenant d’élevages synchrones | n.i. | 5-7 jours |
| W & K (1998) F. fimetaria | juvéniles provenant d’élevages synchrones | n.i. | 23-26 jours |
| ISO (1999) | juvéniles provenant d’élevages synchrones | n.i. | 10-12 jours |
| OCDE (2005) | adultes provenant d’élevages synchrones | n.i. | adultes |
3. Récipients d’essai et matériaux
| Document | Récipient d’essai | Couvercle | Type de sol l’essaiNotes de bas de page4 | Quantité de sol par récipient |
|---|---|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | tube en verre de 5 × 2 cm, bouché hermétiquement | bouchon fermant hermétiquement | SA, SN | 4 ± 0,1 g par tube, poids sec (~5 g, poids humide) |
| W & K (1998) I. viridis | tube en verre de 5 × 2,5 cm, bouché hermétiquement | bouchon fermant hermétiquement | SA, SN | 4 ± 0,1 g par tube, poids sec (~5 g, poids humide)Notes de bas de page5 |
| W & K (1998) F. fimetaria | cylindre; 6 cm de diamètre, 5,5 cm de hauteur; tamis à mailles 1 mm au fond; bouché | couvercles aux deux extrémités | SA, SN | 30 g par récipient, poids humide |
| ISO (1999) | bocal en verre de 100 mL; 5 cm de diamètre; fermé hermétiquement | disque en plastique ou en verre, ou feuille de Parafilm® | SA | 30 g par récipient, poids humide |
| OCDE (2005) | partiellement transparent; couvercles transparents qui réduisent l’évaporation d’eau, mais qui permettent les échanges gazeux | verre ou plastique inerte | SA, SN | quantité correspondant à 25 g, poids sec; 3-4 cm d’épaisseur |
4. Description des sols d’essai et composition du sol artificiel
| Document | Description du ou des sols d’essai | Composition du sol artificielNotes de bas de page6 |
|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | sol normaliséNotes de bas de page7 additionné de la substance d’essai (p. ex., substance chimique dans de l’eau désionisée ou dans un solvant organique; si insoluble, substance d’essai mélangée à du sable quartzeux finNotes de bas de page8) et d’eau distillée ou désionisée | 10 % de tourbe de sphaigne,Notes de bas de page9, 20 % de kaolin avec ≥30 % de kaolinite, et 70 % de sable industriel renfermant >50 % de particules de 50-200 μm; pH ajusté à 6,0 ± 0,5 au moyen de CCaCO3 |
| W & K (1998) I. viridis | sol normaliséNotes de bas de page7, Notes de bas de page10 additionné de la substance d’essai (p. ex., substance chimique dans de l’eau désionisée ou dans un solvant organique; si insoluble, substance d’essai mélangée à du sable quartzeux finc) et d’eau distillée ou désionisée | 10 % de tourbe de sphaigne,Notes de bas de page9, 20 % de kaolin avec ≥30 % de kaolinite, et 70 % de sable industriel renfermant >50 % de particules de 50-200 μm; pH ajusté à 6,0 ± 0,5 au moyen de CCaCO3 |
| W & K (1998) F. fimetaria | sol normaliséNotes de bas de page7 additionné de la substance d’essai (p. ex., substance chimique dans de l’eau désionisée ou dans un solvant organique; si insoluble, substance d’essai mélangée à du sable quartzeux finNotes de bas de page8) et d’eau distillée ou désionisée | 10 % de tourbe de sphaigneNotes de bas de page12, 20 % de kaolin avec ≥30 % de kaolinite, et 70 % de sable industriel renfermant >50 % de particules de 50-200 μm; pH ajusté à 6,0 ± 0,5 au moyen de CCaCO3 |
| ISO (1999) | sol artificiel additionné de la substance d’essai (p. ex., substance chimique dans de l’eau désionisée ou dans un solvant organique; si insoluble, substance d’essai mélangée à du sable quartzeux finNotes de bas de page11) | 10 % de tourbe de sphaigneNotes de bas de page12, 20 % de kaolin avec ≥30 % de kaolinite, et 70 % de sable industriel renfermant >50 % de particules de 50-200 μm; pH ajusté à 6,0 ± 0,5 au moyen de CCaCO3 |
| OCDE (2005) | sol artificiel ou normaliséNotes de bas de page13 additionné de la substance d’essai (p. ex., substance chimique dans de l’eau désioniséeNotes de bas de page14 ou dans un solvant organique; si insoluble, substance d’essai mélangée à du sable quartzeux finNotes de bas de page15) | 5 ou 10 % de tourbe de sphaigneNotes de bas de page16, 20 % de kaolin avec >30 % de kaolinite, et 69-70 %Notes de bas de page17 de sable industriel séché à l’air et renfermant >50 % de particules de 50-200 μm; pH ajusté à 6,0 ± 0,5 au moyen de CaCO3 |
5. Manipulation du sol artificiel avant l’essai
| Document | Mélange | Hydratation | Ajustement du pH |
|---|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | réunir les constituants secs dans les bonnes proportions et mélanger avec un peu d’eau désionisée; hydrater | hydrater jusqu’à obtention d’une structure granulaire moyenne; normalement jusqu’à 40-60 % de la CRE totale | aucun ajustement lorsque les substances d’essai sont acides ou alcalines |
| W & K (1998) I. viridis | réunir les constituants secs dans les bonnes proportions et mélanger avec un peu d’eau désionisée; hydrater | hydrater jusqu’à obtention d’une structure granulaire moyenne; normalement jusqu’à 40-60 % de la CRE totale | aucun ajustement lorsque les substances d’essai sont acides ou alcalines |
| W & K (1998) F. fimetaria | réunir les constituants secs dans les bonnes proportions et mélanger avec un peu d’eau désionisée ou distillée; hydrater | hydrater jusqu’à obtention d’une texture poreuse une semaine avant le démarrage de l’essai | aucun ajustement lorsque les substances d’essai sont acides ou alcalines |
| ISO (1999) | réunir les constituants secs dans les bonnes proportions et mélanger avec un peu d’eau désionisée; hydrater | hydrater jusqu’à obtention d’une structure granulaire moyenne; normalement jusqu’à 40-60 % de la CRE totaleNotes de bas de page18 | n.i.Notes de bas de page19 |
| OCDE (2005) | mélanger les constituants secsNotes de bas de page20 | hydrater jusqu’à ~50 % de la CRE maximaleNotes de bas de page21 (correspond à une teneur en humidité de 50 ± 10 % du poids sec); la teneur en humidité devrait être optimisée jusqu’à obtention d’une texture poreuse peu dense | n.i. |
6. Sol témoin négatif
| Document | Description du sol témoin négatif | Nombre de récipients témoins (répétitions) |
|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | préparer de la même manière que pour les sols d’essai, mais sans la substance d’essai; préparer des témoins supplémentaires si des substances auxiliaires autres que l’eau sont utilisées pour dissoudre la substance d’essai (p. ex., solvant organique, sable quartzeux) | ≥3 |
| W & K (1998) I. viridis | préparer de la même manière que pour les sols d’essai, mais sans la substance d’essai; préparer des témoins supplémentaires si des substances auxiliaires autres que l’eau sont utilisées pour dissoudre la substance d’essai (p. ex., solvant organique, sable quartzeux) | ≥3 |
| W & K (1998) F. fimetaria | préparer de la même manière que pour les sols d’essai, mais sans la substance d’essai; préparer des témoins supplémentaires si des substances auxiliaires autres que l’eau sont utilisées pour dissoudre la substance d’essai (p. ex., solvant organique, sable quartzeux) | ≥4 |
| ISO (1999) | préparer de la même manière que pour les sols d’essai, mais sans la substance d’essai; préparer des témoins supplémentaires si des substances auxiliaires autres que l’eau sont utilisées pour dissoudre la substance d’essai (p. ex., solvant organique, sable quartzeux) | 5 |
| OCDE (2005) | préparer de la même manière que pour les sols d’essai, mais sans la substance d’essai; ajouter des solvants organiques, du sable quartzeux ou autres matières à des témoins supplémentaires dans des quantités correspondant à celles utilisées dans les traitements | ≥4 |
7. Entreposage et caractérisation du sol d’essai
| Document | Conditions d’entreposage | Caractérisation du sol |
|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | entreposer les sols d’essai mélangés dans des récipients en verre fermés à 15 ºC jusqu’à utilisation | teneur en humidité et pH après hydratation |
| W & K (1998) I. viridis | entreposer les sols d’essai mélangés dans des récipients en verre fermés à 15 ºC jusqu’à utilisation | teneur en humidité et pH après hydratation |
| W & K (1998) F. fimetaria | n.i.Notes de bas de page23 | teneur en humidité et pH après hydratation |
| ISO (1999) | n.i., s.o.Notes de bas de page24 | teneur en humidité et pH après hydratation |
| OCDE (2005) | n.i., s.o. | CRE et pH |
8. Essai préliminaire : nombre d’organismes par récipient, nombre de répétitions par traitement, nombre de concentrations par échantillon et facteur de dilution recommandé
| Document | Nombre d’organismes par récipient | Nombre de répétitions par traitement ou concentration | Nombre de concentrations par échantillon ou matière d’essai | Facteur de dilution recommandé |
|---|---|---|---|---|
| W & K 1998 F. candidaNotes de bas de page25, Notes de bas de page26 | 10 | n.i.27 | 5 | série géométrique28 |
| W & K 1998 I. viridisNotes de bas de page25, Notes de bas de page26 | 20 | n.i. | 5 | série géométriqueNotes de bas de page28 |
| W & K 1998 F. fimetariaNotes de bas de page25, Notes de bas de page29 | 20Notes de bas de page 3030 | 1 | 4 + témoin | série géométriqueNotes de bas de page 3131 |
| ISO 1999Notes de bas de page25, Notes de bas de page 3232 | 10 | 1 | 4 + témoin | série géométriqueNotes de bas de page 3131 |
| OECD 2005Notes de bas de page25, Notes de bas de page 33 F. fimetaria | 20Notes de bas de page 3030 | 2 | 5 + témoin | série géométriqueNotes de bas de page 3434 |
| OECD 2005Notes de bas de page25, Notes de bas de page 33F. candida | 10 | 2 | 5 + témoin | série géométriqueNotes de bas de page 3434 |
9. Essai définitif : nombre d’organismes par récipient, nombre de répétitions par traitement, nombre de concentrations par échantillon et facteur de dilution recommandé
| Document | Nombre d’organismes par récipient | Nombre de répétitions par traitement ou concentration | Nombre de concentrations par échantillon ou matière d’essai | Facteur de dilution recommandé |
|---|---|---|---|---|
| W & K 1998 F. candida | 10 | ≥ 3 | ≥ 5 + témoin | niNotes de bas de page 3535, Notes de bas de page 3636 |
| W & K 1998 I. viridis | 20 | ≥ 3 | ≥ 5 + témoin | niNotes de bas de page 3636, Notes de bas de page 3737 |
| W & K 1998 F. fimetaria | 20Notes de bas de page 3838 | ≥ 4 | NI | ni Notes de bas de page 3939, Notes de bas de page 4040 |
| ISO 1999Notes de bas de page 4141 | 10 | pour CSEO : 5 | ≥ 5 + témoin | geometric seriesNotes de bas de page 4242 |
| ISO 1999 | pour CEx : ≥2 pour les traitements et 5 pour les témoins | 12 + témoin | geometric seriesNotes de bas de page 4343 | |
| OECD 2005 F. fimetaria | 20Notes de bas de page 3838 | ≥ 4 | NI | ni Notes de bas de page 3939, Notes de bas de page 4040 |
| OECD 2005 F. candida | 10 | ≥ 4 | ≥ 4 + témoinNotes de bas de page 4444 | niNotes de bas de page 3535, Notes de bas de page 4545 |
10. Alimentation et aération pendant l’essai
| Document | Type de nourriture recommandé | Quantité de nourriture, mode opératoire et fréquence | Aération des récipients d’essai |
|---|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | granules de levure de boulanger | déposer 3 granules dans chaque tube au début de l’essai et au moment de chaque transfert hebdomadaire | n.i.Notes de bas de page 4646 |
| W & K (1998) I. viridis | granules de levure de boulanger | déposer 3 granules dans chaque tube au début de l’essai et au moment de chaque transfert hebdomadaire | n.i. |
| W & K (1998) F. fimetaria | levure sèche de boulanger | déposer 15 mg de levure au début de l’essai et après 14 jours | n.i. |
| ISO (1999) | levure sèche granulée | déposer ~2 mg de levure sèche granulée dans chaque récipient d’essai au début de l’essai et après 14 jours; fermer hermétiquement les récipients après alimentation | ouvrir brièvement les récipients d’essai 2 fois par semaine pour permettre l’aération |
| OCDE (2005) | levure sèche granulée de boulanger | déposer 15 mg de levure au début de l’essai puis tous les 14 jours | n.i. |
11. Température et éclairage pendant l’essai
| Document | Température (ºC) | ÉclairageNotes de bas de page 4747 |
|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | 15 + 0,5 | 12 h C/12 h O ou 16 h C/8 h O; intensité de <1000 lux |
| W & K (1998) I. viridis | 15 + 0,5Notes de bas de page 4848 | 16 h C/8 h O; intensité de <1000 lux |
| W & K (1998) F. fimetaria | 20 + 1 | 12 h C/12 h O; intensité de 400-800 lux |
| ISO (1999) | 20 + 2 | 12 h C/12 h O ou 16 h C/8 h O; intensité de 400-800 lux à la surface du substrat |
| OCDE (2005) | 20 + 2 | 16 h C/8 h O de préférence; intensité de 400-800 lux autour des récipients d’essai |
12. Mesures et observations biologiques pendant l’essai
| Document | MesuresNotes de bas de page 4949 | Observations biologiques |
|---|---|---|
| W & K 1998 F. candida | TH et pH, chaque traitement, au début et à la fin de l’essaibNotes de bas de page 5050, Notes de bas de page 5151 | nombre d’adultes vivants par récipient d’essai, mesure de la longueur du corps de chaque adulte vivantNotes de bas de page 5252 et nombre de juvéniles éclos des œufs prélevés du solNotes de bas de page 5353 , une fois par semaine et à la fin de l’essai |
| W & K 1998 I. viridis | TH et pH, chaque traitement, au début et à la fin de l’essaiNotes de bas de page 5050, Notes de bas de page 5151 | nombre d’adultes vivants par récipient d’essai, mesure de la longueur du corps de chaque adulte vivantNotes de bas de page 5252, une fois par semaine et à la fin de l’essai |
| W & K 1998 F. fimetaria | TH et pH au début et à la fin de l’essai Notes de bas de page 5151, Notes de bas de page 5454 | nombre d’adultes vivants par récipient d’essai, nombre de descendants par récipient d’essai à la fin de l’essai |
| ISO 1999 | TH et pH, chaque traitement, au début et à la fin de l’essai; repeser périodiquement les récipients d’essai au cours de l’essaiNotes de bas de page 5555, Notes de bas de page 5656 | nombre de collemboles adultes et juvéniles vivants par récipient d’essai à la fin de l’exposition |
| OECD 2005 | TH et pHNotes de bas de page 5757, chaque traitement, au début et à la fin de l’essai; peser les récipients d’essai au début et ensuite une fois par semaineNotes de bas de page 5858 |
13. Fin de l’essai, paramètres biologiques et paramètres statistiques
| Document | Fin de l’essai | Paramètres biologiques | Paramètres statistiques |
|---|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | extraire les collemboles du sol contenu dans les tubes à intervalles d’une semaine pendant l’exposition et à la fin de l’essai; déposer le sol de chaque tube dans un récipient plus grand et recueillir les collemboles à l’aide d’un aspirateur à air manuel | taux moyen de survie, longueur moyenne des organismes et nombre moyen de juvéniles produits pour chaque concentration pendant chaque intervalle | CE10 et CE50 pour la croissance et la reproduction (mg/kg de sol, poids sec) |
| W & K (1998) I. viridis | extraire les collemboles du sol contenu dans les tubes à intervalles d’une semaine pendant l’exposition et à la fin de l’essai; déposer le sol de chaque tube dans un récipient plus grand et recueillir les collemboles à l’aide d’un aspirateur à air manuel | taux moyen de survie et longueur moyenne des organismes produits pour chaque concentration pendant chaque intervalle | CE10 et CE50 pour la croissance (mg/kg de sol, poids sec) |
| W & K (1998) F. fimetaria | au bout de 3 semaines, extraire les organismes de chaque récipient d’essai à l’aide d’un extracteur à haut gradient thermiqueNotes de bas de page 5959 | taux de mortalité, taux de perte ou d’augmentation de biomasse des adultes et nombre de descendants produits | CE10, CE50 et CL50 pour la mortalité chronique et la croissance (mg/kg de sol, poids sec) |
| ISO (1999) | 4 semaines après avoir déposé les collemboles reproducteurs sur les substrats d’essai et témoins, transvaser le substrat d’essai dans un récipient de 500-600 mL et ajouter de l’eau; remuer délicatement la suspension; compter les adultes et les juvéniles qui flottent à la surface de l’eauNotes de bas de page 6060 | nombre moyen d’adultes et de juvéniles pour chaque concentration; taux de mortalité des adultes par concentration; nombre moyen de descendants produits pour chaque concentration après 28 jours | CSEO et CE Notes de bas de page 6161 x |
| OCDE (2005) | extraire les collemboles du sol à l’aide d’un extracteur à haut gradient thermiquea ou par flottationNotes de bas de page 6262 | taux de mortalité et nombre de descendants produits | CL50, CEx et CSEO |
14. Critères de validité de l’essai; recours à un essai toxicologique de référence
| Document | Critères de validité de l’essai | Toxique(s) de référence | Mode opératoire et conditions de l’essai toxicologique de référence |
|---|---|---|---|
| W & K (1998) F. candida | ≥10 juvéniles par adulte reproducteur vivant dans le sol témoin chaque semaine; taux de mortalité des adultes dans le ou les témoins : < 20 % | aucun recommandé à l’heure actuelle | n.i.Notes de bas de page 6666 |
| W & K (1998) W & K (1998) I. viridis | taux de mortalité des adultes dans le ou les témoins : < 50 % | aucun recommandé à l’heure actuelle | n.i. |
| W & K (1998) F. fimetaria | > 200 juvéniles par récipient d’essai taux de mortalité des adultes dans le ou les témoins : < 20 % | diméthoateNotes de bas de page 6363 | déterminer les effets sur la survie et la reproduction |
| ISO (1999) | ≥100 larves par récipient témoin; CV pour la reproduction dans le témoin : ≤30 %; taux de mortalité des adultes dans le ou les témoins : ≤20 % | Betanal plus; E 605 forteNotes de bas de page 6464, Notes de bas de page 6565 | déterminer les effets sur la survie et la reproduction 1-2 fois par année |
| OCDE (2005) F. fimetaria | > 200 juvéniles par récipient d’essai taux de mortalité des adultes dans le ou les témoins : < 20 %; CV pour le nombre de juvéniles dans le ou les témoins : < 25 % | à déterminer | déterminer les effets sur la survie et la reproduction |
| OCDE (2005) F. candida | ≥100 juvéniles par récipient d’essai taux de mortalité des adultes dans le ou les témoins : < 20 %; CV pour le nombre de juvéniles dans le ou les témoins : < 25 % | à déterminer | déterminer les effets sur la survie et la reproduction |
Détails de la page
- Date de modification :