Information sur des aliments nouveaux – le 2’-fucosyllactose issu de Escherichia coli BL21 (DE3)

Santé Canada a avisé Jennewein Biotechnologie, GmbH, qu'il n'a aucune objection à l'utilisation du 2'-fucosyllactose (2'-FL) dérivé d'une souche génétiquement modifiée d'E. coli BL21 (DE3), « la souche de production » ou « la souche », comme ingrédient pour les préparations pour nourrissons. Le Ministère a effectué une évaluation exhaustive de cet oligosaccharide conformément à ses Lignes directrices pour l'évaluation de l'innocuité des aliments nouveaux. Les présentes lignes directrices sont fondées sur des principes reconnus à l'échelle internationale pour établir l'innocuité des aliments à caractères nouveaux.

Contexte :

Voici un résumé de la déclaration de Jennewein Biotechnologie GmbH et de l'évaluation de Santé Canada. Ce document ne contient aucun renseignement commercial confidentiel.

1. Introduction

Jennewein Biotechnologie, GmbH, a mis au point le 2'-fucosyllactose à partir d'une souche de E. coli BL21 (DE3) génétiquement modifiée en utilisant des techniques de recombinaison de l'ADN. Le 2'-FL synthétisé par les bactéries se caractérise par une pureté de ≥ 90 % et est destiné à être utilisé dans les préparations conçues pour les nourrissons à terme, jusqu'à un niveau d'utilisation maximal de 1,2 g de 2'-FL par litre de préparation. Jennewein a spécifié que le niveau d'utilisation serait de 1,0 g +/- 0,2 g de 2'-FL par litre de préparation pour nourrissons, ce qui permettrait de tenir compte des tolérances de fabrication et d'assurer la conformité. Le 2'-FL est un oligosaccharide naturellement présent dans le lait humain et composé de L-fucose et de D-lactose (un disaccharide formé de D-galactose et de D-glucose). Il a été confirmé que le 2'-FL synthétisé par la bactérie produit par Jennewein est chimiquement équivalent au 2'-FL isolé du lait humain. Le 2'-FL peut soutenir la santé du nourrisson en tant que substrat prébiotique pour les bactéries commensales et également fonctionner comme modulateur du système immunitaire. Cette évaluation ne comprenait pas un examen des allégations potentielles qui pourraient avoir été faites à propos du 2'-FL. Des modifications génétiques ont été apportées à la bactérie E. coli BL21 (DE3) dans le but d'insérer les gènes intervenant dans la voie biosynthétique du 2'-FL. La souche a été conçue pour produire du 2'-FL à partir du lactose comme substrat et pour sécréter le 2'-FL dans le milieu de croissance.

L'évaluation de l'innocuité effectuée par les évaluateurs scientifiques de la Direction des aliments a été réalisée conformément aux Lignes directrices pour l'évaluation de l'innocuité des aliments nouveaux de Santé Canada. Ces lignes directrices sont fondées sur les efforts d'harmonisation avec d'autres organismes de réglementation et reflètent l'orientation internationale dans ce domaine (p. ex., Codex Alimentarius). L'évaluation de l'innocuité a tenu compte de la façon dont le 2'-FL a été élaboré et de la façon dont la composition et la qualité nutritionnelle de cet ingrédient sont comparées à celles des oligosaccharides du lait humain (OLH), ainsi que de la possibilité que le 2'-FL soit toxique ou cause des réactions allergiques. Jennewein a fourni des données qui démontrent que le 2'-FL peut être utilisé sans danger dans les préparations destinées aux nourrissons à terme.

La Direction des aliments est chargée par la loi de l'évaluation préalable à la mise en marché des nouveaux aliments et des nouveaux ingrédients alimentaires, comme le précise le Titre 28 de la Partie B du Règlement sur les aliments et drogues (aliments nouveaux). Comme le 2'-FL dont il est question ici est produit par une bactérie modifiée génétiquement, il est considéré comme un aliment nouveau dans la partie suivante de la définition des aliments nouveaux :

« c) aliment dérivé d'un végétal, d'un animal ou d'un micro-organisme qui, ayant été modifié génétiquement,

iii. présente un ou plusieurs caractères qui ne se trouvent plus dans les limites prévues pour ce végétal, cet animal ou ce micro-organisme. »

2. Mise au point du microorganisme modifié

La souche de production a été dérivée de la souche mère E. coli BL21 (DE3) bien caractérisée, que l'on a génétiquement modifiée pour introduire plusieurs constructions géniques. L'introduction de ces constructions a permis d'obtenir la souche de production contenant la voie biosynthétique complète pour le 2'-FL. Par conséquent, cette souche est capable de convertir le lactose en 2'-FL et d'exporter le 2'-FL dans le milieu. La souche a également été soumise à une mutagénèse chimique pour améliorer son rendement. La souche de production n'est pas présente dans le produit final.

L'insertion de la voie biosynthétique du 2'-FL dans la souche de production comportait plusieurs étapes d'intégration.

La synthèse du 2'-FL nécessite deux co-substrats : le lactose et le β-GDP-L-fucose (GDP-fucose). Le lactose est importé du milieu de croissance dans la cellule par une perméase encodée par lacY. Le GDP-fucose est dérivé de la voie de biosynthèse du fucose endogène. Les substrats sont ensuite liés par l'enzyme 2-fucosyltransférase encodée par wbgL, ce qui aboutit à la production du 2'-FL.

3. Caractérisation du microorganisme modifié

La caractérisation moléculaire de la souche a été effectuée à l'aide du séquençage du génome entier (WGS) et du séquençage Sanger. On a déterminé le nombre de copies de chaque construction qui a été intégrée au génome ainsi que le locus de chaque insertion. Chaque construction a été intégrée de façon stable dans le génome, comme l'a démontré le séquençage du génome entier des intermédiaires de la souche de production ainsi que de la souche finale. On a également déterminé les séquences de cicatrices d'insertion et on a obtenu une séquence consensus fermée pour la souche de production. Aucun réarrangement génomique n'a été observé et toutes les constructions sont restées dans leurs sites d'insertion prévus.

Une recherche des cadres de lecture ouverts et des polymorphismes nucléotidiques (PN) a été effectuée pour toutes les insertions dans la souche. Toutes les modifications ou tous les déphasages des acides aminés observés ont été examinés et le pétitionnaire a conclu que tout changement involontaire n'a pas eu d'impact important sur l'expression du 2'-FL. Le pétitionnaire a indiqué que la possibilité d'une expression protéique non intentionnelle ne serait pas préoccupante en matière de sécurité, puisque le produit final ne contient aucune protéine. Cette absence de protéines dans le produit final a été démontrée pour cinq lots du 2'-FL.

Le pétitionnaire a fourni des cartes plasmidiques pour les vecteurs utilisés dans la production de la souche. On a ajouté les séquences des squelettes de vecteur au génome de référence au cours de l'analyse de la séquence du génome entier afin de s'assurer qu'aucun ADN provenant du squelette des vecteurs n'a été transféré à la souche de production. La cartographie des lectures selon la méthode Illumina n'a montré aucune couverture séquentielle pour les fragments spécifiques aux plasmides, ce qui a confirmé l'absence de séquences de squelettes de vecteur dans la souche de production.

La liste des organismes donneurs utilisés dans la création de la souche de production par génie génétique a été examinée et jugée acceptable. Tous les gènes introduits ne posent pas de problème de sécurité en ce qui concerne le transfert non intentionnel d'ADN étranger inconnu à la souche de production.

4. Information sur le produit

Le 2'-FL est produit au moyen d'une fermentation axénique par lots dans des conditions stériles dans une installation conforme aux bonnes pratiques de fabrication (BPF) actuelles. La fermentation par lots est effectuée dans un milieu minimal à base de sel, défini chimiquement, qui ne contient ni inhibiteurs ni antibiotiques. Une fois un certain niveau de 2'-FL sécrété dans le milieu, le surnageant de culture contenant le 2'-FL est recueilli et la biomasse microbienne est éliminée par filtration. Le filtrat contenant le 2'-FL est purifié par une série d'échangeurs d'ions pour éliminer les protéines, l'ADN, les acides organiques et les sels inorganiques. Le filtrat est ensuite concentré, décoloré et purifié. Après les étapes de filtration (comprenant un filtre de 3 kDa pour éliminer les endotoxines), la solution finale est emballée sous forme de concentré liquide contenant 45 % (p/v) de 2'-FL dans de l'eau ou elle est séchée par pulvérisation pour produire une poudre blanche solide.

5. Exposition alimentaire

Les concentrations d'oligosaccharides du lait humain (OLH) vont de 20 g/L dans le colostrum à 12 g/L dans le lait maternel (Thurl et coll., 2010). Les nourrissons allaités seraient donc exposés à des quantités allant jusqu'à 12 g d'OLH par jour. Comme le lait bovin contient moins d'oligosaccharides que le lait humain, et plus particulièrement moins de 2'-FL, les nourrissons qui reçoivent des préparations à base de lait bovin non enrichies sont actuellement exposés à moins d'oligosacharides et de 2'-FL que les nourrissons nourris au lait humain.

L'exposition alimentaire des nourrissons qui consomment du 2'-FL dans les préparations pour nourrissons serait inférieure ou équivalente à l'exposition actuelle des nourrissons allaités, puisque le taux d'addition de 2'-FL proposé dans les préparations est inférieur à celui du lait maternel. Le lait maternel contient en moyenne 2,38 g de 2'-FL/L (Erney et coll., 2000), ce qui est environ deux fois plus élevé que la valeur maximale proposée par le pétitionnaire, qui est de 1,2 g de 2'-FL/L (y compris l'excédent).

6. Données nutritionnelles

Chez les nourrissons, les OLH sont transportés dans les parties inférieures de l'intestin et ils sont soit métabolisés, soit excrétés dans les fèces. Marcobal et Sonnenburg (2012) indiquent que même si les nourrissons sont capables de métaboliser le lactose, ils ne possèdent pas les glycoside hydrolases normalement présents dans l'intestin grêle ni les transporteurs membranaires intestinaux nécessaires pour métaboliser les OLH. Deux grands groupes de bactéries commensales dans l'intestin du nourrisson, spécifiquement Bifidobacterium et Bacteroides, sont capables de consommer les oligosaccharides. Les données examinées laissent entendre que le 2'-FL agit de la même façon que d'autres oligosaccharides fermentables, en ce sens qu'il est métabolisé en acides gras à chaîne courte ou excrété. On ne s'attend pas à ce que le 2'-FL ait un effet négatif sur l'absorption des nutriments.

On a examiné les résultats d'une étude clinique sur la tolérance du 2'-FL synthétisé chimiquement et ses effets sur la croissance chez des nourrissons de la naissance à l'âge de 4 mois réalisée par Marriage et coll., 2015. L'étude incluait deux groupes d'essai. Un groupe a consommé 0,2 g/L de 2'-FL et un deuxième groupe a reçu 1,0 g/L de 2'-FL ainsi que des galacto-oligosaccharides (GOS), de sorte que la teneur totale en fibres alimentaires du régime était de 2,4 g/L. On n'a pas ajouté de fibres alimentaires au régime du groupe témoin. Un groupe alimenté au lait humain a été inclus comme groupe de référence. Il n'y avait aucune différence notable entre les groupes pour ce qui est du poids, de la longueur ou de la circonférence de la tête. Toutes les préparations ont été bien tolérées et comparables sur le plan de la consistance moyenne des selles, du nombre de selles par jour et du pourcentage de tétées ayant donné lieu à des régurgitations ou des vomissements. Cette étude fournit une preuve de la sécurité et de la tolérance du 2'-FL chez les nourrissons. Le Bureau of Chemical Safety (BCS) a conclu que la forme de 2'-fucosyllactose obtenue par synthèse chimique était chimiquement équivalente à celle de Jennewein obtenue par fermentation au moyen de E.coli GM. Par conséquent, le 2'-FL de Jennewein permettrait d'obtenir des résultats semblables à ceux du lait humain tant en ce qui concerne la croissance que la tolérance.

L'utilisation du 2'-FL de Jennewein à un niveau maximal de 1,2 g par litre de préparation destinée aux nourrissons à terme (y compris l'excédent) ne pose aucun problème de sécurité nutritionnelle. Une évaluation plus poussée de la nouvelle préparation pour nourrissons avec 2'-FL proposée sera effectuée au moment de la présentation de la déclaration avant la mise en marché, conformément au Titre 25 du Règlement sur les aliments et drogues.

7. Microbiologie

La souche hôte E. coli BL21 (DE3) est une souche non pathogène bien caractérisée qui a été largement utilisée dans l'industrie biopharmaceutique comme hôte d'expression des protéines recombinantes et a servi à la fabrication d'au moins un ingrédient alimentaire (β-galactosidase, USFDA GRN 485). E. coli BL21 (DE3) ne possède pas le plasmide de fertilité, ce qui indique qu'il est incapable de transférer son ADN à d'autres organismes. Il est également incapable de coloniser l'appareil digestif humain.

E. coli BL21 (DE3) n'exprime pas de lipopolysaccharides à longue chaîne et les endotoxines qu'il produit ne sont pas toxiques, comme l'ont confirmé les essais de toxicité aiguë par voie orale chez les souris (examinés par PTAS, section H). Le procédé de fabrication du 2'-FL comprend une étape de filtration à l'aide d'une membrane de 3 kDa qui éliminerait toute endotoxine potentielle. La spécification pour les endotoxines (≤ 300 EU/g) et la méthode d'essai validée utilisée pour tester chaque lot de poudre de 2'-FL avant la mise en marché ont été jugées acceptables. Il n'y a pas de problème de sécurité concernant les endotoxines dans le produit final.

La souche de production possède des gènes de résistance antimicrobienne intégrés dans son génome à la suite du procédé de mise au point de la souche. Toutefois, ces gènes de résistance aux antimicrobiens ne posent pas de problème de sécurité puisque le produit final est dépourvu d'ADN transgénique, comme l'a démontré l'analyse qPCR en temps réel de cinq lots de 2'-FL. Les résultats de l'analyse qPCR ont confirmé l'absence des gènes de résistance respectifs dans le produit final. En outre, il n'y a aucune préoccupation concernant les produits d'expression des gènes de résistance aux antimicrobiens, puisque le produit final est dépourvu de protéines, comme l'a démontré l'essai de cinq lots de 2'-FL.

Les spécifications microbiologiques et les méthodes d'essai validées ont été fournies pour le 2'-FL final tant sous forme de poudre que de concentré liquide. Des certificats d'analyse ont été fournis pour le 2'-FL pendant l'étape de mise au point du produit ainsi que pour le produit final devant être mis en marché. Les spécifications, les méthodes et les résultats des essais ont tous été jugés acceptables. Les spécifications comprenaient la totalité des microorganismes et des toxines microbiennes se rapportant aux préparations pour nourrissons. Le pétitionnaire a démontré avec succès l'absence de la souche de production dans le produit final. Il n'y a aucune préoccupation concernant les spécifications ou la sécurité microbienne du 2'-FL.

8. Chimie

Le pétitionnaire a fourni des spécifications pour son produit, soit le 2'-fucosyllactose (2'-FL; CAS RN 41263-94-9), y compris des valeurs limites pour les éléments traces et les sucres résiduels, qu'ils ont établies en l'absence de spécifications pour cette substance énoncées dans le Codex sur les produits chimiques alimentaires ou dans le Compendium combiné des spécifications sur les additifs alimentaires préparé par le Comité mixte FAO/OMS d'experts sur les additifs alimentaires (CMEAA).

Le 2'-FL produit par fermentation de la souche de production contient de petites quantités d'autres glucides qui n'ont pas été enlevées au cours des diverses étapes de purification du procédé de fabrication. Ces glucides sont des sucres présents naturellement dans le lait humain ou, dans le cas du fucosylgalactose, comme produits de dégradation dans le corps humain.

Les résultats des analyses des éléments traces toxiques - arsenic, cadmium, plomb et mercure - ont été fournis par le pétitionnaire, ce qui démontre que le 2'-FL respecte constamment les limites pour ces éléments traces établies dans les spécifications du pétitionnaire. qui sont jugées suffisamment basses. L'addition du 2'-FL aux aliments spécifiés par le pétitionnaire, au taux d'utilisation proposé, ne représenterait que des quantités négligeables de plomb, d'arsenic, de mercure et de cadmium dans les préparations pour nourrissons dans lesquelles il est utilisé.

Une liste des matières utilisées dans la production du 2'-FL par fermentation de la souche de production a été incluse dans la soumission. L'acceptabilité d'utilisations particulières de substances à des fins technologiques dans la fabrication du 2'-FL est distincte de l'acceptabilité de l'aliment lui-même. De façon plus générale, il incombe au pétitionnaire de s'assurer que la présence de contaminants dans le produit et l'utilisation de toute substance dans la fabrication du 2'-FL ne constituent pas une infraction à l'article 4 de la Loi sur les aliments et drogues. À cet égard, le pétitionnaire a fait remarquer que toutes les matières utilisées dans la production du 2'-FL sont de qualité alimentaire.

Le pétitionnaire a fourni des données qui démontrent suffisamment que le 2'-FL produit par fermentation de la souche de production est chimiquement équivalent au 2'-FL isolé du lait humain et au 2'-FL obtenu par synthèse chimique utilisé dans les études cliniques sur la croissance et la tolérance qui ont été évaluées dans le cadre de la soumission. Le niveau d'utilisation proposé du 2'-FL produit par la souche dans les préparations destinées aux nourrissons à terme ne pose aucun problème de sécurité chimique.

9. Toxicologie

L'organisme de production ne devrait pas contenir ni produire de substance toxique puisque la souche d'origine E. coli BL21 (DE3) est utilisée pour la fabrication de préparations pharmaceutiques qui peuvent être injectées aux patients et n'est associé à aucun effet toxicologique.

La présence de l'endotoxine de E. coli, le lipopolysaccharide (LPS), a été évaluée chez les souris. Les animaux ont reçu une dose orale aiguë égale à 3,7 x 107 unités d'endotoxine (UE)/kg p.c. de LPS de E. coli BL21 (DE3). On a observé aucune mortalité ou variation du poids corporel ni de signes cliniques de toxicité pendant les 14 jours suivant le traitement. Aucune lésion ou pathologie grave n'a été signalée à la nécropsie. Dans le cadre de cette étude, une dose de 3,7 x 107 UE/kg p.c. de LPS de E. coli BL21 (DE3) n'a pas produit d'effets toxiques chez les souris.

La spécification montre que la préparation de 2'-FL est testée pour l'absence d'endotoxines bactériennes (lipopolysaccharides; ≤ 300 UE/g de préparation; équivalent aux préparations pour nourrissons renfermant ≤ 360 UE par L) et de sous-produits toxiques associés aux moisissures (aflatoxines; < 0,025 µg/kg). Les concentrations de ces impuretés sont jugées suffisamment faibles pour ne pas poser de problème toxicologique.

Le 2'-FL devrait être métabolisé par les bactéries intestinales en acides gras à chaîne courte ou excrété intact dans les matières fécales. Moins de 5 % de 2'-FL peut être absorbé, intact, par le nourrisson. Il est prévu que le profil d'absorption, de distribution, de métabolisme et d'excrétion de la préparation de 2'-FL est typique de celui des autres oligosaccharides, et il ne devrait pas poser de problème toxicologique.

Une étude de toxicité subchronique (90 jours) par voie orale a été réalisée sur vingt rats Sprague-Dawley, dont dix mâles et dix femelles. L'étude a été menée conformément aux Lignes directrices de l'OCDE (essai n° 408). Les rats ont reçu du 2'-FL à une concentration constante de 0 ou 10 % dans leur alimentation. Les rats mâles et femelles ont consommé une dose équivalente de 7,66 et 8,72 g/kg p.c. par jour, respectivement, pendant 13 semaines. Les animaux des groupes témoins ont reçu le régime de base. Tous les animaux ont survécu à la nécropsie. Quelques changements statistiquement significatifs dans la consommation alimentaire (augmentation de 7 % chez les mâles traités) et la biochimie clinique (phosphatase alcaline; augmentation de 24 % chez les femelles traitées) ont été observés chez les rats traités avec le 2'-FL comparativement aux rats soumis au régime de base. Aucune donnée de référence historique n'a été fournie. Toutefois, ces effets n'étaient pas accompagnés de modifications du poids corporel ou du poids du foie ni d'altérations histologiques et n'ont pas été observés de façon uniforme entre les sexes; par conséquent, ces effets n'ont pas été jugés pertinents sur le plan toxicologique. Les auteurs de l'étude ont déterminé une dose sans effet nocif observé (DSENO) de 7,66 g/kg p.c. par jour pour le 2'-FL.

Les résultats d'un essai de mutation bactérienne inverse in vitro (test de Ames) ont montré que le 2'-FL n'est pas mutagène chez S. typhimurium (souches TA98, TA100, TA102, TA1535 et TA1537; 5 mg/plaque; essai 471 de l'OCDE). De plus, la dose de 2'-FL fournie, allant jusqu'à 2 g/kg p.c., n'était pas génotoxique à l'égard des érythrocytes immatures de la souris, in vivo (essai 474 de l'OCDE). Dans les conditions de ces études, le 2'-FL n'était pas considéré comme génotoxique.

Le pétitionnaire a fourni une étude de tolérabilité portant sur des porcelets nouveau-nés ayant reçu une préparation pour nourrissons enrichie en 2'-FL pendant une période de 3 semaines. L'étude a été menée selon plusieurs normes de BPL. Quatre à huit animaux par sexe et par groupe ont été traités avec 0, 200, 500 ou 2 000 mg de préparation de 2'-FL/ml de Jennewein le jour de lactation 2 (égal à une dose de 0,29 g/kg p.c. par jour) jusqu'au jour de lactation 23. Tous les animaux ont survécu à la nécropsie. Aucun changement clinique ou physique n'a été observé chez les porcelets auxquels on a attribué la substance à l'essai. Il n'y avait aucune différence dans le poids corporel moyen, la consommation d'aliments ou l'efficacité alimentaire entre les groupes. On a observé des fèces aqueuses chez les mâles et les femelles des groupes exposés à de fortes, moyennes et faibles doses. Certains animaux du groupe soumis à de fortes doses ont montré un manque d'appétit. Toutefois, le pétitionnaire a déclaré que cet effet n'a pas montré de relation dose-effet et que les animaux n'ont pas subi pas de modifications dans leur croissance ou leur apport alimentaire global. Les auteurs ont conclu que ces effets indésirables n'étaient pas pertinents sur le plan toxicologique. Au cours de la nécropsie, les auteurs ont noté une inflammation légère ou modérée de l'épithélium dans la partie non glandulaire de l'estomac chez deux animaux du groupe recevant la dose élevée et une femelle du groupe recevant la dose moyenne. Les auteurs ont fait valoir que les animaux du groupe témoin présentaient également une inflammation aiguë minimale ou légère de l'estomac (5 mâles/1 femelle et 1 femelle, respectivement). Les auteurs ont conclu que ces résultats microscopiques étaient fortuits, n'avaient aucun lien avec l'administration de la substance à l'essai et étaient typiques des porcs de cet âge et de cette souche. Aucune toxicité n'a été observée à la dose la plus élevée testée, soit 0,29 g/kg p.c. par jour.

Le pétitionnaire a fourni une étude contrôlée randomisée sur la croissance et la tolérance menée auprès de nourrissons en bonne santé et à terme auxquels on a administré des doses de 2'-FL chimiquement synthétisé à des concentrations de 0,2 g/L ou de 1 g/L (N = 101-109 nourrissons par groupe) pendant 119 jours. Les nourrissons des groupes témoins ont reçu une préparation contenant des galacto-oligosaccharides (2,4 g de GOS/L; N = 189) ou du lait maternel (N = 106; ~ 2 g de 2'-FL/L). On a donné aux nourrissons du 2'-FL chimiquement synthétisé à des concentrations inférieures au niveau d'inclusion prévu du 2'-FL (1,2 g/L) par le pétitionnaire. On a observé que les nourrissons ayant reçu jusqu'à 1 g/L de 2'-FL toléraient la préparation et croissaient normalement. La fréquence des infections semblait significativement plus élevée sur le plan statistique dans le groupe exposé à une forte dose; toutefois, on n'a pas noté de relation dose-effet claire. Cet effet indésirable a été considéré comme fortuit et non lié au traitement. En général, les réactions indésirables et les symptômes gastro-intestinaux étaient semblables chez les nourrissons des groupes traités et témoins. Les résultats de cette étude suggèrent qu'une préparation de 2'-FL relativement pure serait bien tolérée par les nourrissons lorsqu'elle est consommée dans des préparations pour nourrissons à un niveau de 1 g/L.

Sur le plan du poids corporel, les nouveau-nés sont les plus grands consommateurs des aliments qui pourraient contenir du 2'-FL. Le 90e percentile des consommateurs de cette sous-population (nouveau-nés consommant jusqu'à 260 ml/kg p.c. par jour de préparation pour nourrissons) pourrait être exposé à 0,31 g de 2'-FL/kg p.c. par jour.

On a calculé que la marge d'exposition (ME) du 2'-FL était d'environ 25 fois inférieure à la DSENO signalée dans l'étude de toxicité subchronique par voie orale de 90 jours (la dose la plus élevée testée chez les rats mâles). La marge d'exposition est jugée suffisante du point de vue de l'innocuité, compte tenu de l'absence d'effets nocifs pertinents sur le plan toxicologique chez les rats, les porcelets et les humains. D'après les résultats obtenus, le 2'-FL produit par la souche de production ne posera pas de problème de sécurité, du point de vue toxicologique, lorsqu'il est fourni à un taux allant jusqu'à 1,2 g/L dans les préparations pour nourrissons.

10. Allergénicité

Le 2'-FL est un oligosaccharide de lait humain non protéiné qui ne devrait pas provoquer de réaction allergique induite par les IgE chez les consommateurs. La souche de production a été modifiée pour exprimer un certain nombre de transgènes; cependant, le pétitionnaire a déclaré que la préparation est dépourvue de protéines en raison de l'utilisation d'échangeurs i pendant le procédé de filtration, comme le détermine une version modifiée de la méthode de Bradford (Nanoquant; ≤ 100 µg de protéine/g de préparation). Étant donné que la préparation est essentiellement dépourvue de protéines, y compris d'allergènes protéiques potentiels, la préparation de 2'-FL ne posera pas de problème de sécurité pour les consommateurs, du point de vue des allergies.

Conclusion

L'examen par Santé Canada des renseignements présentés à l'appui de l'utilisation du 2'-FL dérivé de la souche de production dans les préparations pour nourrissons ne soulève pas de préoccupations liées à l'innocuité des aliments.
L'opinion de Santé Canada ne s'applique qu'à l'utilisation du 2'-FL comme ingrédient dans les préparations pour nourrissons.

Le présent document d'information sur les aliments nouveaux a été préparé pour résumer l'opinion concernant le produit en question fournie par la Direction des aliments, Direction générale des produits de santé et des aliments, Santé Canada. Cette opinion est fondée sur l'examen exhaustif des renseignements soumis par le pétitionnaire conformément aux Lignes directrices pour l'évaluation de l'innocuité des aliments nouveaux.

(Also available in English)

Pour de plus amples renseignements, veuillez communiquer avec :

Santé Canada
Section des aliments nouveaux
Direction des aliments
Direction générale des produits de santé et des aliments
251, promenade Sir Frederick Banting
PL2204E
Ottawa (Ontario) K1A 0K9